Описторхоз (эксперименты и клинические испытания)

 

Исследование проводилось с 2001 по 2004 гг. к.м.н. Поддубной О. А. Э.И.Белобородовой, И.Л.Пурликом под руководством д.м.н., профессор Е.Ф.Левицкого в Томском НИИ курортологии и физиотерапии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию совместно с кафедрой зоологии беспозвоночных биологопочвенного факультета Томского государственного университета и кафедрой патологической анатомии Сибирского государственного медицинского университета были проведены экспериментальные исследования in vitro (на половозрелых маритахOpisthorchis felineus)иin vivo (модель хронического описторхоза) эффективности КВЧ-воздействия в режиме ФРИ.

Результаты исследований отражены в монографии Поддубная О.А. и др. Современные подходы к немедикаментозному лечению описторхоза. Томск, 2007.

Описторхоз - гельминтоз, вызываемый паразитированием в печеночных ходах и в протоках поджелудочной железы гельминта - кошачьей (сибирской) двуустки - Opisthorchis felineus.В России расположен почти весь мировой ареал описторхоза, вызываемого кошачьей двуусткой. Очень высокая заболеваемость на 1 тысячу населения регистрируется в Томской (841,1)и Тюменской (645,9) областях [10].В настоящее время описторхоз рассматриваетсякакобщее заболевание организма, обусловленное поражением многих органов и систем. Комплекс патогенетических факторов - токсических, механических,нейрогенных,вторичных инфекционных - приводит к системному поражению органов пищеварения и выраженномуразнообразию клинической картины.Но доминирующим является симптомокомплекс поражения органов гепатобилиарной системы с различными функциональныминарушениями в ней [Хронический описторхоз и пищеварительная система / Э.И.Белобородова, М.И. Калюжина, Ю.А. Тиличенко и др. - Томск: Изд-во Томского ун-та, 1996. - 116 с.].

Проблема разработки новых подходов к лечению хронического описторхозаостается одной из актуальных.Медикаментознаядегельминтизацияне гарантирует устранения имеющихся функциональных нарушений, а в ряде случаеввызывает развитие побочных эффектов. Поэтому особое значение приобретаетразработкабезлекарственных методов лечения этой категории больных (фитотерапии и физиотерапии). Для лечения описторхоза сегодня используется эффективное (85,5%) растительное средство экорсол [Экорсол : Метод. пособие / Сост:М.Е. Мозжелин., Д.В. Кадуков. – Томск: ООО «Гарт», 2001.- 20 с.],которое хорошо переносится, но при этом к его назначению имеется ряд противопоказаний.

В Томском НИИ курортологии и физиотерапии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию совместно с кафедрой зоологии беспозвоночных биологопочвенного факультета Томского государственного университета и кафедрой патологической анатомии Сибирского государственного медицинского университета были проведены экспериментальные исследования in vitro (на половозрелых маритахOpisthorchis felineus)иin vivo (модель хронического описторхоза) эффективности КВЧ-воздействия в режиме ФРИ.

 

Эксперименты in vitro

Получение и культивирование описторхисов проводили по методу Г.В. Кандинского. Предварительно на 200 описторхисах были отработаны оптимальные условия культивирования (среда Хенкса).

Изучалось влияние средства, содержащего субстанцию с записью КВЧ-излучения частотно-волновых характеристик описторхиса с помощью аппарата КВЧ-терапии СЕМ-ТЕСН в сравнении с антигельминтными препаратами экорсолом и бильтрицидом.

Было использовано 200 марит половозрелыхOpistorchis felineus, которые были помещены в 4 чашки Петри со средой для культивирования, по 50 штук в каждую чашку. В каждую из трех чашек помещали одно из средств (бильтрицид, экорсол или фоновый резонансный излучатель), ачетвертая служила контролем (без воздействия).

Динамическое наблюдение проводилось в течение 10 дней. Оценка жизнеспособности описторхисов проводилась по следующим критериям: двигательная активность, ответная реакция на раздражение кисточкой и изменение окраски. При этом для оценкижизнеспособности гельминтов использовалась трехбалльная шкала, где: в 3 балла оценивалась– хорошая подвижность и ответная реакция на раздражение и отсутствие изменения окраски, в 2 балла – удовлетворительные подвижность и реакция на раздражение, частичное изменение окраски, в 1 балл – слабая подвижность и слабая реакция на раздражение, значительное изменение окраски, 0 баллов – подвижность и ответная реакция не определяются, полное изменение окраски. Гельминтоцидный эффект оценивался по факту гибели марит.

Статистическая обработка полученных результатов производилась методами непараметрической статистики, так как распределения основных показателей отличались от нормального. Использовали пакет прикладных программ Statistica 6.0. Для сравнениягрупп – использовали критерий Манна-Уитни. Если р был меньше 0,05, то различия между группами считались статистически значимыми.

В чашках Петри с добавлением антигельминтного препарата бильтрицида отмечен высокий антигельминтный эффект, гдемассоваягибельмарит отмечалась уже со 2-го дня эксперимента, к 4-му дню отмечена 100% гибель описторхисов. При этом жизнеспособность всех особей в данном случае снижалась до 2-1 баллови изменение окраски (полное и частичное)отмечалось на 2-й день наблюдений, и изменения эти быстро прогрессировали, приводя к гибели гельминтов.При использовании экорсола антигельминтное действие развивалось медленнее: на 3-й день наблюдений погибло 18 из 50 марит (36%) со снижением критериев жизнеспособности до 2-1 баллов, на 6-й день –погибло 44 из 50 (88%), а к 8 днюотмечалась 100% гибель. В контрольной группе также отмечалась гибель описторхов, что, вероятно, было обусловлено неблагоприятным воздействием искусственных условий содержания.

Полученный нами в эксперименте in vitro результат эффективности изучаемых антигельминтных препаратов совпадает с данными литературы по данному вопросу. Результаты этой серии опытов представлены в табл.1. Сравнительный анализ антигельминтного действия изучаемых факторов показал, что ФРИ-воздействие по эффективности приближается к экорсолу (р=0,51) и статистически значимо отличается от контроля (р=0,047).

Таблица 1

Антигельминтная эффективность изучаемых факторов

Группы	% гибели марит по дням наблюдений
	2	3	4	5	6	7	8	9	10
Бильтрицид	72	92	100
Экорсол	16	36	56	72	88	96	100
ФРИ	16	48	56	60	72	80	88	96	100
Контроль	0	8	12	24	32	44	72	78	80

 

Эксперименты in vivo

С целью проверки результатов антигельминтной эффективности изучаемых факторов, полученных в экспериментеin vitro, проведена серия опытовin vivo, в которых было использовано 40 золотистых хомячков (Crecetus padus), зараженных описторхозом. Заражение проводилось путем кормления хомячков в течение 7 дней сырой рыбой – ельцами (Leuciscus idus), выловленной в реке Томь и исследованной микроскопически на наличие метациркариев.Затем поддерживался обычный рацион питания в течение 30 дней. Вскрытие хомячков производили через 30 дней после заражения.

После контрольного вскрытия двух из них было доказано заражение - обнаружено 90 и 95 марит. Остальные 38 были разделены на две группы по 19 животных. Первая группа в качестве лечения получали по 1,0 мл 1% водного раствора экорсола, вводимого через металлический зонд 3 раза в день, в течение 7 дней. Во второй группе лечение проводилось с использованием фонового резонансного излучателя аппарата СЕМ-ТЕСН с записанным спектром излучения описторха, который помещался в емкость с питьевой водой и оставался в нейтакже 7 дней.

После лечения было произведено вскрытие хомячков и подсчитано фактическое количество выделенных описторхисов, которое статистически значимо различалось в исследуемых группах (р=0,016) (рис.1).

 

Рис. 1. Сравнение количества выделенных после лечения описторхисов

Исследуемые группы животных

 

Анализ полученных данных доказывает более высокую антигельминтную эффективность (на 78%) ФРИ-воздействия при использовании егов качестве лечебного факторав эксперименте invivo.

 

Клинические испытания

Клиническое наблюдение проведено за 106 пациентами сдиагнозом: Хронический описторхоз, хронический холецистит (холангиохолецистит), дискинезия желчевыводящих путей, с преобладаниемгипомоторных нарушений.В клинической картине у большинства обследованных пациентов преобладали признаки дисфункции желчевыводящей системы (тошнота - 87%, изжога - 89%, горечь во рту - 72%, тяжесть и чувство распирания в области правого подреберья - 93%, запоры - 68%),астенический синдром (головные боли, недомогания, общий дискомфорт, нарушение сна - 64%), признаки вегетативной дисфункции (кардиалгии, повышенная потливость,эмоциональная лабильность - 57%).

Все пациенты получали комплексное лечение, включавшее диету, лечебную физкультуру, хвойные ванны, внутрижелудочный электрофорез желчегонного фитосбора. Средняя продолжительность курса 12-15 дней.

Критериями оценки эффективности проведенного лечения являлись данные клинических и параклинических исследований (данные УЗИ гепатобилиарной системы, дуоденального зондирования, микроскопического и биохимического исследования желчи,данные общего и биохимического анализа крови.

Пациенты были разделены на три группы методом простой рандомизации, в результате группы оказались сопоставимыми по возрасту, полу, длительности и тяжести заболевания, наличию сопутствующих заболеваний.

ФРИ-терапию проводили с помощью аппарата СЕМ-ТЕСН одним из двух способов. Способ №1 – излучатель размещают на телепациента(фиксируют с помощью лейкопластыря) в проекции печени (область правого подреберья), по среднеключичной линии, ниже правой реберной дуги на 1–1,5 см, сроком на 7 дней (снимают излучатель на время приема общих водных процедур, во время проведениявнутрижелудочного электрофореза, на время сна).Способ №2–излучательпомещают в жидкость(питьевая вода), которая уже через 1,5 секунды готова к употреблению, иназначают в количестве по 100-150 мл 3-4 раза в день за 30-40 минут до еды,в течение 7 дней.Выборспособазависит от индивидуальных особенностей: при повышенной чувствительности кожи к медицинскому лейкопластырю, при наличии повреждений в зоне предполагаемой локализации – использовали способ №2,при отсутствииперечисленных особенностей – способ № 1.При предварительном сравненииэффективности предлагаемых способов статистически значимых отличий выявлено не было.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась с помощью пакета прикладных программ Statistica 6.0. Проверка на соответствие распределений нормальному закону проводилась с помощью теста Шапиро-Уилка. Если распределение не отличалось от нормального, то результаты представлялись в виде М+s, где М – среднее арифметическое, s – среднеквадратическое (стандартное) отклонение, а сравнение групп проводилось с помощью критерия Стьюдента. Если распределение в группах отличалось от нормального, то для сравнениясвязанных групп использовали критерий Вилкоксона, а для несвязанных - критерий Манна-Уитни. Если р был меньше 0,05, то различия между группами считались статистически значимыми.

Первая группа (35 человек) была пролечена с дополнительным применением КВЧ-терапии с записанным спектром ЭМИ половозрелой мариты описторха.

Клиническая переносимость лечебного курса оценивалась как хорошая. У 99% пациентов после лечения отсутствовали клинические жалобы.Эффект лечения (отсутствие яиц описторхисов в желчи) нарастал от 68%(у 24 пациентов) после лечения до 85% (у 30 пациентов) через 12 месяцев. У всех пролеченных пациентов улучшились показатели сократительной функции и объемные характеристики желчного пузыря: объем пузырной порции желчи уменьшился с 81,3+5,2 до 68,3+3,6 мл (р<0,05), через 6 месяцев этот показатель еще уменьшился до 49,9+4,8 мл и оставался в пределах нормы при наблюдении до 12 месяцев. Сохраняемость терапевтического эффекта была от 6 (90% пролеченных) до 12 (58% пролеченных) месяцев.

Пациенты второй группы (31 человек) на фоне комплексного лечения получали антигельминтную терапию препаратом Экорсол, который назначался также с 3-4 дня лечения по 6 г 3 раза в день через 30-40 минут после еды в течение 7 дней. После лечения у 91% пациентов исчезли жалобы, у 62% исчезли яйца описторхов в желчи. Объем пузырной порции желчи уменьшился с 79,8+4,2 до 68,4+3,8 мл (р<0,05). Сохраняемость терапевтического эффекта от 6 (85% пролеченных) до 12 (43% пролеченных) месяцев. При сравнении этих результатов с результатами лечения в первой и третьей группах статистически значимых отличий обнаружено не было.

Таблица 2

Эффективность проведенноголечения

Изучаемый показатель	Срокиоценки эффективности
	До лечения	После лечения	Через 6 месяцев	Через 12 месяцев
Отсутствие жалоб и обращений	Группа 1: 0% Группа 2: 0% Группа 3: 0%	99% 91% 89%	90% 85% 56%	58% 43% 24%
Отсутствие яиц Оpist.fel. в желчи	Группа 1: 0% Группа 2: 0% Группа 3: 0%	68% 62% 17%	83% 85% 14%	85% 87% 11%
Объемпузырной желчи (мл)	Группа 1: 81,3±5,2 Группа 2: 79,8±4,2 Группа 3: 78,6±5,2	68,3±3,6 68,4±3,8 69,3±4,4	49,9±4,8 51,2±4,8 61,2±3,2	56,3±4,1 57,2±3,9 65,7±6,5

 

Пациентам третьей группы (контроль – 40 человек) антигельминтная терапия не проводилась. У большинства пациентов улучшились показатели сократительной функции и объемные характеристики желчного пузыря. Незначительный антигельминтный эффект (значительно меньший, чем в 1 и 2 группах - р<0,001) можно объяснить улучшением дренажной функции желчевыводящей системы. Сравнение эффективности лечения в разных группах пациентов показано в табл.2.

Таким образом, противоописторхозный эффект ФРИ-терапии по предложенной методике аналогичен антигельминтному препарату Экорсол. Достоинством КВЧ-метода является то, что проводится безмедикаментозная противоописторхозная терапия, что избавляет пациентов от побочных эффектов лекарственных средств и позволяет провести лечение у больных с непереносимостью и аллергией на эти препараты. При этом на фоне достаточного противоописторхозного эффекта выявлено благоприятное влияние на показатели функциональной активности желчевыводящих путей. Ни у одного больного не было отмечено неблагоприятных побочных эффектов КВЧ-терапии.

Экономическая эффективностьразработанныхлечебных комплексов выражается в сокращении сроковстационарного леченияпо сравнению с традиционными методами с 18-21до 12-14 дней, что позволяет снизить стоимость лечения.Такжесокращается длительность ичастота возникновения обострений (по обращаемости) в течение года наблюдения, более чем у70%пациентов, что позволяетсократить сроки нетрудоспособности. Социальная эффективность выражается в большей доступности лечения и повышении качества жизнибольных в связи с уменьшением частоты обострений.

Назначение больным хроническим описторхозомкомплексного лечения, включающего ФРИ-терапию,способствуетснижению числа осложнений и побочныхявлений при высокой эффективности лечения, за счет увеличения сроков ремиссии,сокращения ранних рецидивов,связанных сдискинетическими нарушениями в желчевыделительной системе, улучшением внутрипеченочной гемодинамики и биохимической структуры желчи.Полученные результаты позволяют рекомендовать предлагаемый способ длябезмедикаментозной дегельминтизации при хроническом описторхозе в амбулаторных и стационарных условиях.

 

 

---

 Версия для печати